MILE米乐 P53 Elisa试剂盒仅限于科学研究用途，严禁用于医学诊断。本试剂盒采用双抗体一步夹心法（ELISA）进行检测，涉及的主要原理是将标本、标准品以及HRP标记的检测抗体依次加入预先包被adropin（AD）抗体的微孔中。通过温育和彻底洗涤后，使用底物TMB进行显色反应，TMB在过氧化物酶的催化作用下首先转化为蓝色，随后在酸性环境中变为最终的黄色。显色的深浅与样品中adropin（AD）的浓度呈正相关，最后通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），以计算样品浓度。

样品的收集、处理及保存方法如下：

• 血清：选择不含热原和内毒素的试管，避免过程中产生任何细胞刺激。在收集血液后，以3000转的速度离心10分钟，以迅速、谨慎地分离血清和红细胞。
• 血浆：使用EDTA、柠檬酸盐或肝素作为抗凝剂，离心3000转30分钟后，取上清液。
• 细胞上清液：在3000转的条件下离心10分钟，以去除颗粒和聚合物。
• 组织匀浆：在适量生理盐水中将组织捣碎，之后以3000转离心10分钟，取上清。
• 保存：如果样本未能及时检测，建议按一次用量分装并冻存于-20℃，避免反复冻融，解冻时在室温下确保样品充分均匀。

关于试剂的准备，20×洗涤缓冲液应按1：20的比例用蒸馏水进行稀释，即1份20×洗涤缓冲液加入19份蒸馏水。洗板的具体操作步骤需依照试剂盒说明进行。

为验证结果，需绘制标准曲线。在Excel中，以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标，生成标准品的线性回归曲线，并根据曲线方程计算样品浓度。

最后，使用MILE米乐 P53 Elisa试剂盒时，请遵循上述操作注意事项，以确保实验的准确性和可靠性。